技术快报----OpenSPR检测数据助力推进生物治疗药物的新发现

2022-11-27 点击数:0 分享至:

白细胞在我们的免疫系统中起着至关重要的作用。为了保护我们的身体免受疾病的侵袭,需要足够数量的白细胞。不幸的是,有许多不同的膜活性毒素,包括白细胞毒素,会以白细胞为目标并诱导其死亡。利哈伊大学研究员Angela c.Brown博士使用OpenSPR的局部表面等离子共振技术,为她提供了她最近发表文章所需要的关键数据。“抑制白细胞活性的受体肽”,使用OpenSPR获取的数据证明了使用靶向性肽可抑制人白细胞中白细胞毒素介导的细胞毒性的可能性。

 

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摘要

     Aggregatibacter actinomycetemcomitans是一种革兰氏阴性细菌,可导致局部侵袭性牙周炎,这是一种发生在青少年身上的侵袭性牙周病。这种细菌分泌一种称为白细胞毒素(LtxA)的重复毒素(RYX)蛋白,这种蛋白可以帮助细菌在感染期间避开宿主的免疫反应。LtxA是一种特异性靶向白细胞并由淋巴细胞功能关联抗原-1LFA-1)整合素介导的膜活性毒素。该研究通过使用基于靶向性肽作为抑制LtxA介导的细胞毒性的抗病毒策略来分析LtxA-LFA-1结合的抑制。结果表明,发现与报道的LFA-1上的LtxA结合结构域对应的基于靶向性肽抑制LtxALFA-1的结合,并因此阻止LtxA介导的人免疫细胞中的细胞毒性活性。该文章展示了使用靶向性肽抑制LtxA介导的细胞毒性和其他RTX毒素的可能性。利用表面等离子体共振研究基于靶标的肽与LtxA之间的结合。

 

为什么OpenSPR对这项研究提供了帮助?

表面等离子体共振(SPR)被用来确定五个不同的目的蛋白与LtxA之间的结合。将对应于LFA-1上的LtxA结合结构域的靶向性肽固定在Nicoya的纳米金传感器芯片上,并在OpenSPR系统上运行蛋白质肽实验。通过使用OpenSPRBrown博士能够确定每种肽与LtxA之间相互作用的动力学数据(结合和解离速率常数,平衡常数和亲和力)。结果表明,所有五种肽的LtxA的平衡解离常数(KD)约为10-8M,这表明LtxA对这些肽具有高亲和力。这些结果表明,含有报道过的LFA-1结合位点的小区域的肽保留足够的毒素亲和力以抑制LtxA介导的细胞毒性。此外,这些结果表明LtxA对肽的亲和力与它们的抑制作用直接相关。总之,OpenSPR提供了构想的结合动力学数据证据,即使用靶向肽来抑制LtxA与人免疫细胞中发现的LFA-1集成蛋白的结合,从而抑制由LtxA-LFA-1结合引起的白细胞中的细胞毒性。借助OpenSPR Brown博士的研究实验室能够从他们自己的实验室获得SPR数据。这有助于他们加快研究速度并更快地发表他们的发现。

 

为什么SPR对发表文章至关重要? OpenSPR如何提供帮助?

        SPR是一项无标记的检测技术,研究人员可以定量分析两种生物分子之间的结合。 SPR技术使我们能够确定相互作用的kon,koff和KD,与仅提供终点测量的其他技术(如下拉测定)相比,更能深入了解分子间的相互作用。 SPR不仅对于发表文章是必要的,而且对于许多医学和医学研究领域的发展也是必要的,如下图所示,近几年,依靠SPR数据发表的文章数量呈显著增长。

 

 

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Scientific publications involving SPR have increaseddrastically over the years. SPR has become fundamental for publications whiletraditional techniques like

 

  

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